Отработка технологии лекарственных форм и методов стандартизации фитопрепарата на основе эфедры горной

ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ

2.1 Характеристика сырья, методов исследования, реагентов, растворителей и приборов

Объектом наших исследований являлись противоопухолевый препарат Лейкоэфдин производства АО "Химфарм" (г.Шымкент) и надземная часть травы эфедры горной, растительного сырья для его производства, заготовленной в 2007 г. предгорьях Заилийского Алатау в фазу покоя.
Образцы заготовленного сырья высушивались, измельчались до размера частиц 3-7 мм и использовались для экстракции индивидуальными и смешанными экстрагентами.

Для исследования качественного состава растения и фитопрепарата, составов фракций использованы методы:
- экстракции разнополярными растворителями;
- распределительной хроматографии (одномерной и двумерной) на бумаге (FN-3 и FN-11) в системах растворителей:
1) н-бутиловый спирт-уксусная кислота-вода (40:12.5:29);
2) н-бутиловый спирт-уксусная кислота-вода (4:1:5);
3) уксусная кислота (2%);
4) бензол-уксусная кислота-вода (6:7:3);
5) н-бутиловый спирт - пиридин-вода (6:4:3);
6) бензол – метиловый спирт 8:2; 1:1; 2:3; 2:8;
7) этилацетат – толуол 3:2; 1:1;
- тонкослойной хроматографии на закрепленном сорбенте “Silufol UV-254” в системах растворителей:
1) петролейный эфир – хлороформ в соотношениях 9:1, 8:2, 7:3;
2) хлороформ – метанол в соотношениях 95:5, 9:1, 8:2.
- колоночной хроматографии:
 на сефадексе LH-20 с использованием элюентов: вода-метанол в соотношениях 8:2, 7:3, 6:4, 1:1, 3:7 и чистый метанол;
 на силикагеле L-100/160 с использованием петролейного эфира, смесей петролейный эфир – хлороформ в соотношениях 9:1, 8:2, 7:3 и 1:1, хлороформа и смесей хлороформ- метанол в соотношениях 95:5, 9:1, 7:3, 6:4 и 1:1;
 на полиамиде - элюирование осуществлялось хлороформом и смесями хлороформ - метанол в соотношениях 95:5, 9:1, 7:3, 6:4, 1:1, водой, метанолом и смесями вода – метанол в соотношениях 8:2, 7:3, 6:4, 1:1 и 3:7.

При экстракции сырья, в методах колоночной, ТСХ, хроматографии на бумаге,...

Несмотря на широкую популярность синтетических лекарственных средств, в последние годы препараты на основе растений становятся все более востребованными, благодаря широкому спектру терапевтического действия, мягкости воздействия и практически отсутствию побочного действия на организм даже при длительном применении.
В Республике Казахстан произрастает более 6000 дикорастущих лекарственных растений, однако официальной медициной используется лишь малая их часть. Более 90% растительных препаратов импортируется в Казахстан из России, Украины, Белоруссии и стран дальнего зарубежья.
Согласно действующей программе Правительства Республики Казахстан, обеспечение населения фармпрепаратами отечественного производства должно быть увеличено до 50% к 2014 году. Решением этой задачи может стать повсеместное освоение природных богатств республики, детальное изучение химического состава, фармакологических свойств растений и субстанций на основе растительного сырья, а также развитие собственных фармпроизводств.
Полезные свойства эфедры известны с древнейших времен. Первые упоминания относятся к 5 тыс. до н.э., где в прописях тибетской медицины настои и отвары из эфедры принимали внутрь при остром ревматизме, подагре, язвенной болезни желудка и двенадцатиперстной кишки, заболеваниях легких, бронхите и бронхиальной астме, чахотке, бруцеллезе, крапивнице, а также как потогонное и жаропонижающее средство. Наружно настойку травы на водке использовали и используют в качестве обезболивающего средства при радикулите, ревматизме, как противовоспалительное, кровоостанавливающее и антиаллергическое снадобье.
Эфедра горная широко распространена в Казахстане, являясь доминантой некоторых растительных сообществ, нередко занимая десятки и даже сотни гектаров. Этот вид, кроме значительного количества алкалоидов, содержит дубильные вещества, лейкоантоцианидины, ароматические, феноло- и аминокислоты, флавоноиды и другие биологически активные вещества.
Благодаря высокому содержанию...

1. Определены количественные характеристики доминирующих БАВ в траве эфедры и фитопрепарате: дубильных веществ - 16,55% и 54,01%, флавоноидов - 5,72 % и 16,89%; фенолов – 4,13 % и 20,12%.
2. Изучена растворимость препарата и подобраны оптимальные растворители (вода, низкопроцентные водные растворы спирта).
3. Методом восходящей БХ изучен компонентный состав фитопрепарата, содержит полифенолы, флавоноиды, фенолы и фенолокислоты, катехины, глюкозу; не содержит сердечных гликозидов, кумаринов, сапонинов.
4. Для трех групп БАВ (дубильные вещества, флавоноиды, фенолы) изучено влияние термодинамических параметров (температуры, концентрации, рН) стадий производственного цикла на воспроизводимость результатов предложенных методов стандартизации препарата.
5. Подобраны оптимальные лекарственные формы для препарата “Лейкоэфдин” - таблетки, капсулы и инфузионные растворы.
6. Подобран оптимальный состав действующих и вспомогательных веществ для таблетированной лекарственной формы; методом ВЭЖХ установлена совместимость компонентов; определена подлинность фитопрепарата и лекарственных форм на его основе.
7. С учетом полученных данных проведена оптимизация технологической схемы производства высокоэффективного казахстанского противоопухолевого препарата Лейкоэфдин.
8. Точность, чувствительность и воспроизводимость предлагаемых методик стандартизации и определения подлинности препарата однозначно доказаны статистическим анализом результатов исследования.
Результаты исследования доложены на 7 Международных научно-практических конференциях - в г. Алматы, Шымкенте, Москве, Новосибирске. По результатам дипломной работы опубликовано 5 статей и материалов и 3 тезиса научных конференций.